OIST团队以ALCOR 920飞秒激光器为核心光源,实现乌贼视叶双光子成像,揭示层级偏振编码与14种细胞类型,体现该光源在头足类视觉研究中的关键地位。
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ALCOR 920飞秒激光助力头足类视叶层级偏振编码研究
OIST团队以ALCOR 920飞秒激光器为核心光源,实现乌贼视叶双光子成像,揭示层级偏振编码与14种细胞类型,体现该光源在头足类视觉研究中的关键地位。
ALCOR 920 飞秒激光助力观察头足类视觉研究空白:双光子钙成像实现解码头足类视叶层级偏振编码的神经编码
针对头足类动物虽拥有独立于脊椎动物演化而来的复杂视觉系统且视网膜具备偏振敏感性,但其中枢视叶的神经活动从未被直接记录、视觉信息如何编码以支撑捕猎与伪装等复杂行为长期未知的现状,冲绳科学技术大学院大学(OIST)Sam Reiter 团队在头足类神经生物学领域取得了重要进展。团队实现将双光子钙成像与高密度电生理记录技术应用于头部固定的大鳍礁幼乌贼,实现了对其中枢视叶功能组织的在体表征,揭示了视叶中层级化的偏振与光强信息处理机制。相关成果以 "Hierarchical processing and polarization encoding in the cephalopod visual system" 为题发表。

该研究整合在体电生理与双光子钙成像技术,在头足类行为学和视网膜解剖学既有研究基础上,实现对大鳍礁乌贼视觉中枢实现了单细胞水平的大规模功能解析。其中,ALCOR 920-2-XSight飞秒激光器作为双光子钙成像的激发光源发挥了关键作用:其 920 nm 波长具备良好的深层组织穿透能力,配合稳定的脉冲质量控制,使研究者得以在活体清醒幼乌贼脑内对深层神经元实施高分辨率、长时程的稳定记录。基于这一技术推进,研究取得了四方面主要成果:发现视叶表层存在多达 14 种功能各异的细胞类型,按亚层分别编码光强时空特征与偏振角;揭示从表层低级特征到深层方向选择性的层级化处理架构;阐明髓质神经元对线偏振度局部下降的敏感性及其与光强信息的叠加整合机制;并通过野外水下成像验证偏振视觉在增强近距离物体—背景对比度上的生态优势。这些发现揭示了头足类与脊椎动物在视觉处理上的趋同演化原则,为理解复杂视觉系统的计算原理提供了新的模型。
ALCOR 920-2-XSight:双光子钙成像显微镜的激发光源
在本项研究中,920 nm飞秒激光器(Spark Lasers ALCOR 920-2-XSight)作为双光子荧光激发的核心光源,为头足类视觉中枢在体功能成像提供了重要的物理支撑。
研究团队基于 Thorlabs DIY多光子显微镜套件 MM201 定制搭建激光扫描双光子显微镜,利用该激光器作为激发光源,在 920 nm 激光激发下,与共振-振镜扫描系统联动,在清醒幼乌贼的视叶中激发钙指示剂产生双光子荧光信号,从而获取神经元结构图像和功能性钙活动时序数据,为后续视叶层级处理机制与偏振编码特性的解析提供了原始图像基础。ALCOR 920-2-XSight 的卓越性能保障了研究团队以下三个关键方面的工作:
高质量深层组织成像与单细胞分辨率数据获取: 其 920 nm 近红外输出与钙指示剂激发谱高度匹配,兼具深层组织穿透能力与较低的散射损耗,配合<100fs超短脉冲和可调色散补偿功能,系统能够有效抵消光路中光学元件引入的正色散,确保到达样本平面的脉冲宽度维持在飞秒量级,从而在深层目标区域保持较高的峰值功率与激发效率。以上特性共同保障了在视叶各深度层次均能获取高信噪比的荧光信号,为后续单神经元胞体分辨率的神经活动解析提供了高质量的原始数据基础。
支撑高速平面与多 Z 层体积成像:ALCOR 920-2-XSight 提供 920 nm 飞秒激发光束,在配备 8 kHz 共振扫描器的定制双光子显微镜上,实现 512×512 像素下 15.4 Hz 的高速平面采集;在此基础上,通过 Thorlabs PFM450E 压电物镜扫描器在 5 个 Z 平面(间隔约 40 μm)间切换,达成 3.75 Hz 的体积成像速率。该成像架构有效覆盖了幼乌贼视叶不同深度层次的神经群体,为跨层神经活动的时空动态解析提供了可靠的技术平台。
支撑长时程清醒在体成像实验:激光器选用的920 nm近红外波段,凭借其在生物组织中较低的散射系数与良好的深层穿透能力,有效拓展了对幼乌贼深层视觉神经节的光学可及性。经由光路衰减后,到达样本平面的35–70 mW稳定激发功率,在信号收集效率与光损伤阈值之间建立了精确平衡,既保证了深层神经元钙信号或电压指示剂的高信噪比激发,又避免了长时间连续照明引发的光毒性及荧光漂白,从而使研究者得以在清醒、非麻醉状态的幼乌贼中持续追踪视觉诱发反应及自发神经节律。进一步地,该激光器的同步触发输出与温度控制单元、海水灌注系统及红外行为监测装置无缝集成,实现了光刺激、神经信号采集与生理维持系统间的时序同步,确保了长时程成像过程中实验动物生理状态的稳定与数据采集的连续性。
应用前景:
该研究的成功验证表明,ALCOR 920-2-XSight 凭借其 920 nm 波长、飞秒脉冲宽度与深层穿透能力,为非模式生物复杂视觉中枢的在体、深层、单细胞分辨率成像提供了稳定可控的激发光源,是支撑头足类视叶功能从"关键区域"走向系统解析的关键技术基础。基于此,ALCOR 920-2-XSight 有望在以下新方向持续发挥关键作用:
跨物种比较神经生物学:乌贼视叶曾是"无法记录的关键区域",ALCOR 920-2-XSight 以 920 nm 飞秒光实现证明了软体脑组织的深层双光子成像可行。章鱼、墨鱼等头足类共享相似的软体神经组织与视叶结构,且同样缺乏在体功能成像方案——ALCOR 在乌贼中验证成功的光源参数与功率窗口,可直接复用于这些物种,将单次技术推进转化为头足类乃至更广软体动物门的通用成像平台。
偏振敏感神经编码的精细解析:当前研究已揭示偏振角与偏振度的基础编码机制,但偏振视觉与颜色、运动信息的动态整合仍属空白——这一过程涉及神经元在毫秒级时间窗口内的快速响应序列,对双光子钙成像帧率提出更高要求。然而,帧率提升意味着像素曝光时间缩短,荧光收集效率下降,由此触发时间分辨率与信噪比之间的固有权衡。ALCOR 920-2-XSight 在 920 nm 波长下将光能量压缩至 <100 fs 极窄脉冲,在维持稳定平均功率的同时产生极高峰值功率密度;由于双光子激发效率与峰值功率平方成正比,即便单像素驻留时间大幅压缩,每个飞秒脉冲仍能维持足够的荧光激发效率。配合更高帧率的扫描模态,ALCOR平台可将头足类视觉研究从静态响应图谱推进至动态时序解析,揭示偏振视觉背后的完整神经计算原理。
多脑区与多模态整合研究: 头足类的复杂认知行为不仅依赖视叶,还涉及垂直叶(vertical lobe)等复杂中枢。ALCOR 920-2-XSight 在视叶中验证的 920 nm 深层穿透方案,可向更长波长扩展或结合三光子成像进一步推进深度壁垒,触及这些复杂脑区;其飞秒脉冲无电磁干扰、输出稳定的特性,与电生理记录、行为追踪等模态天然兼容,有望构建从感觉输入到认知输出的完整神经环路。
设备推荐:ALCOR 920-2-XSight光纤飞秒激光器
作为本项头足类视觉前沿研究的“幕后功臣”,Spark Lasers ALCOR 920-2-XSight 光纤飞秒激光器以其卓越的成像性能与高度集成设计,正成为非模式生物在体神经成像领域越来越多顶尖实验室的优先选择。

核心优势:
高信噪比深层成像:输出2.5 W平均功率、80 MHz重复频率及<100 fs超短脉冲,峰值功率高达312.5 kW。920 nm 波长输出与钙指示剂激发谱高度匹配,配合飞秒级超短脉冲与良好峰值功率,确保深层脑组织仍能激发出高亮度荧光信号;
智能色散管理:内置可调色散预补偿模块,可在-90,000 fs²至+120,000 fs²范围内进行定制化配置,主动抵消显微镜光路及深层组织引入的色散,保证物镜焦点处脉冲宽度较窄、激发效率较大化,为跨深度稳定成像提供保障;
集成化高速光控:标配 XSight 声光调制器(AOM)模块,实现激光功率的快速精细调节与高速光开关,完美支持时间复用成像策略,消除视觉刺激与成像激光的光学串扰;
灵活调控脉冲重复频率:重复频率080 MHz可调,可根据实验需求降低重复频率降低生物组织光热损伤,同时保持高信噪比荧光信号;
灵活系统集成:全光纤一体结构,风冷散热,易于系统集成与维护,与 Thorlabs 等开放式双光子显微镜平台无缝兼容,易于与压电物镜扫描器、多模态电生理及行为监测系统深度整合。

无论您致力于非模式生物复杂脑区的层级神经编码解析、清醒动物长时程跨深度的单细胞双光子成像,还是视觉刺激与双光子记录同步的多模态实验构建,ALCOR 920-2-XSight都能凭借其920 nm波段的卓越深层组织穿透能力、内置可调色散预补偿模块以及集成化XSight声光调制器(AOM)高速光控,为您的研究提供稳定、可靠且高度灵活的光源保障。
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