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定量相位成像&荧光成像

发布时间:2022-04-06 09:14:42 浏览量:1848 作者:Paul

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定量相位成像&荧光成像


Phasics提供一种新的定量相位成像技术,不需要标记的情况下可以观察到活细胞,并且准确的对细胞迁移,生长过程做统计分析。这种即插即用的相机依赖于一种横向剪切干涉的专利技术,它可以直接测量穿过细胞的光束相位。这种技术的优势在于极大的增强了观察细胞是的对比度。而且Phasics的技术通过直接测量穿过标本光束的相位,能够提供关于标本的大量信息。



相较于荧光成像,Phasics技术不需要任何标记,因此对于生物标本没有任何损坏。除此之外因为测量的是生物内在的特性,而不是标记染色,因此Phasics的信息更加可靠。最后,Phasics提供一个细胞更加完整的视图:即使没有染色,所有结构也能够清晰的显示,这有助于更好的了解标本及其相互作用。


溶酶体测量

然而,在某些场合下,将应该成像和Phasics技术想结合会非常有趣。这篇文章中,我们将定位并且测量溶酶体的相位特征。将Phasics的设备连接一个常用的明场显微镜,使用普通的卤素灯作为光源,光源前放置一个近红外滤光片。Phasics技术虽然能够增强所有元素的对比度。但不幸的的是,多数囊泡近似圆形,通过简单的观察无法辨认出溶酶体和囊泡之间的区别。因为Phasics技术测量的相位信息,它是正比于样品的折射率以及厚度的。当所有被观测的物体都是接近于圆形的时候,可以通过区分他们之间的折射率来辨别物体。

为了能够区分溶酶体的相对折射率,使用一种特殊的荧光成像方法,只对溶酶体进行染色,改变其折射率。通过下图分析可以得到,溶酶体的折射率相对于其他囊泡是有区别的。




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