在本文中，我们介绍了如何提高生物成像分辨率技术，，并重点介绍了一种暗场米勒矩阵显微镜装置设置的实验搭建和测试方法。
提高生物成像分辨率技术：暗场米勒矩阵显微镜
摘要：在本文中，我们介绍了如何提高生物成像分辨率技术，，并重点介绍了一种暗场米勒矩阵显微镜装置设置的实验搭建和测试方法。
光学荧光显微镜有助于观察在常规光线下通常看不见的生物细胞，提供高分辨率和精确的靶向。相比之下，无标签显微镜不依赖于染料或标记物，它利用自然光学特性，如光偏振来研究样品。
像超表面和无透镜全息术这样的新技术正在扩展MM显微镜的功能。有些系统使用光弹性调制器或塞曼激光器来快速控制光偏振，而不需要移动部件。
所使用的光学设置如图1所示。它利用FYLA的超连续激光作为光源，通过声光可调滤波器选择所需的波长。格兰-汤普森棱镜用于分离垂直偏振光。对于扫描，商用尼康C2单元与其专用控制模块一起使用，允许通过NIS Elements软件管理图像采集。在扫描透镜和管透镜之后，使用半波和四分之一波片来补偿由镜面反射引起的相位延迟。光弹性调制器，定位在45°角，改变偏振状态在大约50千赫，产生一个动态双折射。
图1所示。MM显微镜的光学设置。
校正后，组织样品产生清晰的穆勒矩阵图像，但细胞样品缺乏信号。为了提高对比度，添加了一种类似暗场的检测方案，如图2所示，使用3d打印的光圈来阻挡直射光并捕获散射光。
图2 暗场检测方案。
对章鱼精子头部（类似于染色质的螺旋结构）的测试证实了该系统探测圆形强度微分散射的能力。暗场系统显示出强烈的结果，而明场系统则无法捕获信号。
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