SCMOS相机 光束分析仪 DMD 光纤束 合束激光器 共焦 拉曼光谱仪 锁相放大器 无掩膜光刻机 高光谱相机
光器用于光片荧光显微镜光片荧光显微镜的优点光片荧光显微镜(LSFM)是一种可以对活体标本进行快速且无光毒性3D观测的强大显微成像技术。LSFM技术将宽场成像的速度与适度的光学切片和低光漂白特点相结合,因此也被称为选择性平面照明显微镜(SPIM),或简称为“光片”。SPIM或LSFM共同的定义特征是从侧面对焦平面进行平面照明,在任何给定时间,仅对样品的一小部分进行照明,因此与宽场辐射荧光相比,可以最大限度地减少光损伤并提供改善信噪比的光学切片。此外由于图像是以宽场(2D平行)方式收集的,因此光片成像比一次仅检测一个像素的点扫描共聚焦显微镜快得多。由于三个关键特性,光片荧光显微镜正成为体积成像最流 ...
Bleedthrough还是Crosstalk,这是一个问题以下三张放大40倍图片是FITC标记的肌动蛋白和Cy3标记线粒体,并使用Lumencor SPECTRA X八通道LED显微镜光源对两种荧光染料进行激发,用于显示Bleedthrough和crosstalk的不同表现以及不同的解决方案。图1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激发,485/25滤光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四带通多边分束器和发射滤光片在这幅图像中同时存在bleedthrough和crosstalk现象。Bleedthrough表现为图像中细胞外灰度相对较高(对比图2,已消除bleed ...
于广泛应用于荧光显微镜的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人们追求的目标,尽管最近取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的开发仍然是该领域的热点。与腈相比,炔标记提供了两倍以上的信号强度,并且根据炔在生物分子中的定位,其拉曼信号漂移——末端炔出现在约2100 cm−1处,内部炔出现在约2200 cm−1处——如果选择适当的标记定位组合,就可以对不同的炔标记分子进行多路成像。由于这些原因,炔标记是目前应用最广泛的拉曼标记策略,并已被用于研究脂类、蛋白质、糖和核苷酸。如果您对拉曼光谱成像有兴趣,请访问上海昊量光电的官方网页:https://www.auniontech.com/th ...
105。然而荧光显微镜技术可以捕捉到来自单个分子的信号,即使是最敏感的CRS方法也需要成千上万个目标分子来产生可检测的信号。因此,关注提高灵敏度是扩大CRS技术使用的重要策略。CRS成像的对比度来源于分子化合物的振动特征。对于内源性分子,这种标记的数量是有限的。大量的物种和有限数量的振动特征的结合导致了重叠带结构的密集光谱。在这种背景下识别单个物种构成了振动光谱学的基本挑战。因此,提高CRS分子特异性的方法有机会使该技术得到更广泛的应用。上述这三个性能目标,高光谱成像速度,灵敏度和分子特异性,在过去十年中,已成为CRS显微镜领域发展的重要动力。更多详情请联系昊量光电/欢迎直接联系昊量光电关于昊 ...
间的串扰,在荧光显微镜中使用四个以上探针标记样品具有挑战性,而在共振增强SRS成像中,多探针标记可以扩展到数十个不同的探针。就多重成像而言,这种能力是一个巨大的胜利,因为许多细胞生物学研究需要多个分子参与者的可视化来揭示细胞内的过程和途径。通过共振增强SRS提供的多路复用能力可以进一步推动到更低的探针浓度。通过让探针选择性仅由SRS激发过程决定,原则上可以放宽检测端的带宽。这意味着在拉曼跃迁之后,分子可以在第二步中被激发到发射电子状态,允许通过荧光发射有效地检测发色团。如果电子跃迁以成功的拉曼跃迁为条件,则可以根据其狭窄的拉曼带选择发色团,同时通过高效的荧光检测策略提高探测灵敏度。这一过程被称 ...
荧光相机附在荧光显微镜上实验装置用安装有Lambert HiCAM高速摄像系统的荧光显微镜对斑马鱼进行研究(图2)。将鱼固定在凝胶中,从下方照射。DsRed蛋白的荧光从红细胞中发出。这种光向各个方向发射,其中一些光以相反的方向穿过激光的光路。但是,荧光通过二色镜被定向到相机上,而不是被反射回光源。任何散射的激发光都被二色镜反射。滤光片将去除任何背景光,只透射红细胞荧光发出波长的光。图像传感器将捕捉进来的荧光。捕捉将以每秒数百或数千帧的帧率下进行,每帧的曝光时间数量级在几毫秒到几毫秒的一小部分。电子倍增CCD (EMCCD)传感器的光灵敏度足以捕捉到微弱的荧光。但它们在全分辨率下只能实现大约10 ...
:(1)倒置荧光显微镜:可以用于激光扫描共焦显微成像或者单分子PALM显微成像。(2)半导体激光:405nm激光器作为激活光,561nm激光器作为激发光,激光器波长的选择是要和使用的光活化蛋白的特性有关,用于激发荧光的激光器波长一般包括488、561、594、635nm。激光器功率一般在50-200mW。为了光路调节的方便,一般要求激光器输出光斑质量要好。(3)自由空间或光纤多波长耦合器:自由空间耦合器可以使得更高功率的激发和激活激光进入显微镜系统,使得成像过程可以更快。(4)快门或AOTF(Acousto-Optic Tunable Filter声光可调滤波器):快门或AOTF的作用是切换激 ...
TCSPC技术在荧光寿命成像显微镜中的应用荧光寿命成像显微镜(FLIM)利用荧光的寿命特性,因其对分子环境和分子构象变化的高度敏感性而得到广泛应用。FLIM已广泛应用于研究细胞代谢的自荧光分子成像。自荧光分子的FLIM以非破坏性的方式提供了对细胞健康的独特见解,经常用于研究活体动物。FLIM有利于探测荧光团的分子环境,以了解光强测量无法阐明的荧光团行为。图1中概述了时域和频域的FLIM测量,并在下面进行详细描述。简单地说,时域荧光寿命测量使用短脉冲光进行激发(相对于样品的寿命较短),然后直接(即通过门控检测或脉冲采样)或使用时间分辨电子技术记录荧光分子的指数衰减如图1(a)及1(b)。另外,频 ...
法,如双光子荧光显微镜,宽视场照明不是一个实用的选择,因为现有的超快脉冲激光源不能提供足够的功率来同时激发整个视场。虽然超快激光不能照亮整个领域,但它们的能量足以同时照亮许多感兴趣的点。困难在于有效地将光线重新分配到只需要关注的区域。纯相位型SLM非常适合这项任务,它们可以动态地调整可用于成像和光刺激的活动波束的数量和位置。纯相位SLM通常使用向列相液晶矩阵,类似于多媒体投影仪中使用的矩阵。然而,与通过遮蔽特定像素来生成图像相比,纯相位SLM利用了光的波动特性,本质上就像计算机控制的衍射光栅,其中每个像素引入不同的相位延迟,而不是调制通过的光的强度。这反过来又导致了远场中像的产生,其方式与经典 ...
集中在亮场和荧光显微镜上,其中DMD可以以图1b,d,f所示的理想方式修改光场,以提高测量的速度或空间分辨率等方面。SLM在其他光学传感领域的使用先于它们在拉曼光谱中的使用,这通常需要高保真的光学元件来实现有效的激发(图2)。与拉曼光谱相关的空间光调制的类型说明。常见的例子包括激发束横截面、光谱分散激发脉冲或光谱调制光探测。图案可以包括全息、空间或光谱调制的图案。这些调制的结果包括多点照明或空间/光谱调制。其他类型的调制也可能实现。LC-SLM在光学系统中放置位置的重要性。然而,随着SLMs光学吞吐量的提高,激光激发和拉曼检测损耗已经接近于在拉曼光谱仪器中使用的可接受的操作范围。相位调制空间光 ...
于激光的广域荧光显微镜的定量分析可能非常具有挑战性。在这种情况下,使用a|TopShape可以提供帮助。将显微镜装置中的高斯光束转换为均匀的平顶轮廓,可确保显微镜载玻片的均匀照明,从而使图像更容易识别。在CREOL的一篇I. Khaw等人的论文中了解更多关于a|TopShape在宽场荧光显微镜中的使用,可以在这里下载:https://www.asphericon.com/fileadmin/user_upload/PDFs/Flat-field_illumination_for_quantiative_fluorescence_imaging_Han_Fuchs_2018.pdf基于激光的显微 ...
绍普通的远场荧光显微镜,使用聚焦的远场光束照射荧光分子,由于衍射效应的存在,样品上形成一个有限尺寸的光斑,光斑之内的荧光分子全部被激发并发出荧光。因此光斑内的样品的细节特征无法被分辨,激发光斑的尺寸难以改变,但如果可以使光斑内周围区域的荧光分子处于某种暗态而不发光,那么探测器只能检测到光斑中心区域处于亮态的荧光分子。这样就减小了样品的有效发光面积,从而突破了衍射极限的限制。荧光分子需要在激发态进行自发辐射发出荧光,因此激发态是亮态,STED中采用荧光分子的基态作为暗态。强制使得荧光分子处于暗态的机制采用受激辐射。当激发光光斑内的荧光分子吸收了激发光处于激发态后,用另一束STED光束照射样品,使 ...
像系统与传统荧光显微镜结合使用以在所有三个维度(x、y、z)上实现亚衍射极限成像。SPINDLE可与任何高质量的科学相机兼容,无论是EMCCD还是sCMOS都可以提供定位显微镜所需的高信噪比图像。使用SPINDLE和DH-PSF相位掩模版对细胞微管进行三维超分辨成像在本文中,我们证明了使用SPINDLE单通道模块可以实现高精度、大深度的超分辨率重建。如图1所示,使用Double Helix (DH-PSF) 的相位掩模版与SPINDLE单分子定位显微镜组件结合。系统将单个分子发出的光分成两个光瓣,通过找到两个光瓣的中心来检索发光点的横向(x-y)位置;两光瓣之间的角度编码了发光点的轴向(z)位 ...
制出超分辨率荧光显微镜”,从此人们对点扩散函数(PSF) 工程的认识有了显着提高。Moerner 展示了PSF 工程与Meadowlark Optics SLM 的使用案例,用于荧光发射器的超分辨率成像和3D 定位。PSF工程已被证明使显微镜能够使用多种成像模式对样本进行成像,同时以非机械方式在模式之间变化。这允许对具有弱折射率的结构进行成像,以及对相位结构进行定量测量。已证明的成像方式包括:螺旋相位成像、暗场成像、相位对比成像、微分干涉对比成像和扩展景深成像。美国MeadowlarkOptics公司专注于模拟寻址纯相位空间光调制器的设计、开发和制造,有40多年的历史,该公司空间光调制器产品广 ...
微型化双光子荧光显微镜FHIRM-TPM 2.0,其成像视野是第一代微型化显微镜的7.8倍,同时仪器还具备了三维成像能力,能有效获取小鼠在自由运动行为中大脑三维区域内上千个神经元清晰稳定的动态功能图像,并且实现了针对同一批神经元长达一个月的追踪记录。FHIRM - TPM 2.0成像视野拓宽至420 x420平方微米,微透镜工作距离延长至1 mm,实现无创成像;嵌入可拆卸快速轴向扫描模块,该扫描模块采用了Mirrorcle推出的MEMS扫描镜(MEMS扫描镜 、MEMS扫描镜开发套件),全部由单晶硅制成,也就是说这种设计使运动部件不包括任何易出故障的部件,例如,金属、聚合物、压电材料等。使其拥 ...
,类似于光片荧光显微镜所取得的成果。与高斯光束相比,贝塞尔光束表现出较强的旁瓣,这使得贝塞尔光束用于侧照时轴向分辨率降低。然而,结合狭缝扫描拉曼显微镜,狭缝检测的共聚焦效应可以降低旁瓣对有效PSF的影响,如图1(c)所示。除了旁瓣外,贝塞尔光束在光束传播方向的光分布长度和均匀性方面都比高斯光束有优势。因此,狭缝共聚焦检测可以成功地将高斯光束的上述优点引入到侧光显微镜中。贝塞尔照明拉曼显微镜也有利于提高低浓度样品的灵敏度,因为背景信号的存在在本质上限制了微弱信号的检测能力。侧边照明有效地降低了离焦平面的背景信号,能检测出背景贡献较大时可能被镜头噪声隐藏的微弱信号。由于这种效应,灵敏度的提高足以扩 ...
的优点,与各荧光显微镜适配,每个产品均有配套软件,即插即用,室温下就可运作,几乎不需要预热时间,预计使用寿命为15年。更多型号可点击网页链接: https://www.auniontech.com/details-1803.html。目前Lumencor显微镜光源已实现了在细胞中表观遗传标记的免疫荧光检测[1]、染色质组织和转录活性[2]、果蝇幼虫脂滴成像[3]等课题的研究。关于Lumencor:Lumencor公司致力于促进可持续发展。努力构建清洁、健康、长寿的解决方案。为下一代创新者赋能的同时,也在全球范围内产生影响。上海昊量光电作为Lumencor公司在中国的代理商,可为您提供专业的技术 ...
制出超分辨率荧光显微镜”,从此人们对点扩散函数 (PSF) 工程的认识有了显着提高。Moerner 展示了 PSF 工程与 Meadowlark Optics SLM 的使用案例,用于荧光发射器的超分辨率成像和 3D 定位。 PSF工程已被证明使显微镜能够使用多种成像模式对样本进行成像,同时以非机械方式在模式之间变化。这允许对具有弱折射率的结构进行成像,以及对相位结构进行定量测量。 已证明的成像方式包括:螺旋相位成像、暗场成像、相位对比成像、微分干涉对比成像和扩展景深成像。美国Meadowlark Optics 公司专注于模拟寻址纯相位空间光调制器的设 计、开发和制造,有40多年的历史,该公司 ...
不同于传统的荧光显微镜,其中激发波长短于发射波长,因为两个激发光子的波长长于所得发射光的波长。双光子激发显微通常使用近红外(1064nm)激发光,可以激发荧光染料。使用近红外的好处是可最大限度地减少组织中的散射。由于多光子吸收,同时能够减小背景噪声。这两种效果都会导致这些显微镜的穿透深度增加。基于荧光指示剂的钙成像提供了一种监测动作电位的光学方法,并被系统的用于补充微电极记录,测量体内的神经元活动。这种方法为重建小型模式生物体整个大脑中的神经元群的活动开辟了道路。钙成像技术结合双光子显微镜使得在体内测量深层神经元群体的活动成为可能。随着荧光显微镜技术的迅速发展,纯相位液晶空间光调制器在体钙成像 ...
肌图像由光片荧光显微镜获得。视频显示了红细胞如何流过跳动的心肌。比例尺,50 μm。参考文献:Wang, Z., Zhu, L., Zhang, H. et al. Real-time volumetric reconstruction of biological dynamics with light-field microscopy and deep learning. Nat Methods 18, 551–556 (2021).DOI:https://doi.org/10.1038/s41592-021-01058-x关于昊量光电:上海昊量光电设备有限公司是国内知名光电产品专业代理商, ...
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