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新的探测器和快速成像系统的开发,FLIM成像的速度得到了显著提升。例如,采用SPAD阵列相机和更高效的光子计数系统以及更快速的SPAD探测器,使得FLIM能够以接近视频速率捕获动态生物过程。2. 数据分析的进步:数据处理和分析软件的改进使得从复杂的FLIM数据中提取有用信息变得更加高效和准确。利用机器学习和人工智能算法,可以自动识别和分析FLIM数据中的模式,从而为生物学提问提供更深入的见解。3. 在生物医学研究中的新应用:FLIM技术在监测细胞内环境如pH值、氧气和钙离子浓度变化方面的应用越来越广泛。此外,结合Förster共振能量转移(FRET)技术,FLIM被用于研究蛋白质间的相互作用和 ...
究方法的声誉快速成像工具。由于许多仪器只存在于大型光学开发实验室中,因此缺乏广泛的应用。完整设备的高成本、复杂性和有限的供应商基础无疑导致了CRS的使用规模过小,但人们对技术开发的强烈关注也超过了应用。也许很能说明问题的是,奥林巴斯在首次推出CRS显微镜几年后就放弃了生产。在寻找下一波成功的过程中,对CRS成像的局限性进行一定的反思是不可避免的。常见的CRS显微镜实现的缺点之一是利用窄带宽激光来驱动单个拉曼线,快速成像只产生关于振动光谱非常狭窄部分的信息。虽然比自发拉曼显微镜快几个数量级,但非线性拉曼成像的窄带宽版本提供的光谱信息远不如线性版本。要转变为真正的化学成像工具,需要在不显著影响CR ...
0分钟/帧)快速成像,可达(30 fps)无固有z分辨率光学切片可见光/紫外光束激发增强散射激发与近红外光束增强成像深度易受背景荧光影响对背景荧光免疫全光谱选定的光谱信息表2.CARS和SRS的比较CARSSRS参数化过程能量传递过程新光频信号透射激励光束的强度增益和损耗非特定的非共振背景无非共振背景扭曲的光谱与自发拉曼光谱相同相干图像伪影信号是物体与点扩散函数的卷积非线性浓度依赖性线性浓度依赖性CARS的产生条件与SRS相同,但检测方法不同。在SRS中,可以检测到激励束的强度增益和强度损失,而在CARS,反斯托克斯频率下的新辐射ωaS = 2ωp−ωS 。CARS是由被称为四波混合的光学参量 ...
O 非常适合快速成像,尽管 LIA较低带宽将进一步降低电子噪声。如图4 所示(a)、强非共振CARS 信号来自菜籽油(下部)是可测量的,而在图4(b) 区域内的 FM CARS信号菜籽油显示接近零的非共振信号,因此具有更高的对比度。对比度被量化通过从图4 中的图像中划分非共振和共振信号的平均值(a) 和 (b) 和在标准 CARS图像 2.5 中,而在 FM CARS中为 45.0。因此,18 倍对比度增强和显着提高了可区分性。为了演示获取背景抑制图像的 FM CARS 功能拉曼光谱中的不同共振,菜籽油中的聚苯乙烯 (PS) 珠粒(图4)(c) 和 (d)) 和新鲜用 dDMSO 浸泡两小时的 ...
是时域或频域快速成像的优佳选择。基于广泛的第II代和第III代图像增强器,TRiCATT可为您的实验应用提供高达单光子级别的高灵敏度和光谱带宽。不同型号可供选择(光谱灵敏度,荧光粉,空间分辨率,增益,线性度,门宽和门控频率范围)。对于时域成像,增强器配备了一个快门单元(TRiCATT G40n/G2n),可使增强器作为电光快门操作。该门控单元可在高达2.5MHz的突发脉冲重复频率下工作。一系列不同的增强控制单元提供了从模拟增益控制到全数字控制的功能,包括一个内部触发发生器和可编程门串。对于频域成像,TRiCATT M 支持120MHz(标准) 和更高(外部信号发生器)的增益调制。调制由单片机数 ...
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