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活细胞的“聚光灯”——前沿活细胞成像的案例分享细胞是一切生命的基本单位,构成了各式各样的生命体。因此研究细胞的结构以及内部生命活动过程可以帮助我们更深入地探究生命的奥秘,了解生命体是如何构建和运作的。传统的细胞显微术只能通过观察固定的细胞标本进行推测,但已经失“活”的细胞已经无法反应新陈代谢、信号传导等生命活动,无法反应活细胞的真实情况。因此活细胞显微术越来越受到生命科学研究学者的青睐,能够在细胞仍然活跃并处于正常生理活动的状态下进行观察,帮助科学家更好地研究细胞间的相互作用,以及进行药物研发和筛选等方面的应用。在这里,我们整理了近几年来自Lumencor的白光光源运用于活细胞显微术的前沿研究 ...
性鉴定及分析活细胞、组织和生物体的新陈代谢和线粒体功能障碍方面具有独特价值。FLIM提供的信息不仅限于荧光强度,还包括荧光寿命,这是一种反映荧光分子激发状态持续时间的重要参数。由于荧光寿命信息与荧光分子的浓度无关,它可以用于功能成像,进一步研究分子功能、相互作用及其环境FLIM技术在生物医学研究中的应用日益广泛,尤其是与Förster共振能量转移(FRET)结合使用时,能有效监测细胞内的动态变化。例如,近期关于糖尿病的研究使用FLIM技术研究了由于α和β细胞功能障碍导致的正常血糖水平维持异常,通过NADH自荧光成像检测了葡萄糖刺激前后活细胞岛的代谢变化。FLIM在临床多光子断层扫描中也显示出其 ...
WCNTs对活细胞和组织内进行了表征。这项研究证明了SWCNTs在多重成像应用中的非凡潜力。SWCNTs的荧光发射峰与它们独特的手性指数(n,m)密切相关。为了充分发挥SWCNTs的全部潜力,用于研究单壁碳纳米管的分析工具需要提供准确的光谱和空间信息,实现对不同手性的准确识别和定位。Photon etc.公司的高光谱显微镜(IMA)为这一科学探究提供了不可或缺的帮助。项目取得了重要的研究成果,不仅实现了SWCNTs对17种不同手性的成像,并且对它们的发光光谱进行了细致的识别和分析。图1显示了17种手性碳纳米管(a-b)的光学图像,它们各自的发光光谱由IMA(图2)识别。这项研究不仅推动了光学生 ...
声光偏转器(AODF)在高速荧光成像中的关键作用:FIRE技术简介在上一篇文章中(https://www.auniontech.com/jishu-1142.html),我们学习了发表在Science上的“High-Speed Fluorescence Image-Enabled Cell Sorting”,其中通过AODF实现了一种基于高速荧光成像的细胞分选技术。而这份速度是由FIRE高速荧光成像系统带来的,即使用射频标记发射的荧光成像系统。zui初是由来自加州大学洛杉矶分校的Eric D. Diebold, Brandon W. Buckley等四位科学家于2013年发表于Nature P ...
来研究组织、活细胞或溶液中的纳米材料。从等离子体和其他纳米结构的散射光中获得的信息,有助于我们了解它们的成分、尺寸和分布情况。Photon etc.公司提供两种不同的高光谱暗场成像平台:可调谐激光源(TLS)和IMA,前者允许在激发下进行滤波,后者提供发射滤波TLS由两个模块组成:超连续谱源(宽带源)和基于Photon等的体积布拉格光栅(VBG)技术的激光线可调谐滤波器(LLTF-带通滤波器)。IMA由同样基于VBG的高光谱成像滤光片(超立方体)组成。当与配备暗场聚光镜的研究级显微镜结合使用时,TLS和超立方体可以将该显微镜转换为高光谱暗场设置。这些系统可在可见光(400-1000nm)、近红 ...
Lumencor固态光源在生命科学中的应用教育 Education细胞和分子水平的知识是现代生物科学教育课程的核心。光学显微镜和其他光学技术是这些知识的源泉,因此,使用它们的实践经验是任何全面课程所不可或缺的。在教学实验室环境中使用时,当然希望在各个工作站之间显微镜的性能可以保持一致,并且易于使用和低维护成本也是必不可少的。Lumencor的固态照明光源有LED、光管和激光器所组成,在各个方面都非常合适。常用产品型号SOLA、MIRA、PEKA活体成像 Intravital Imaging活体成像可使用一系列对比机制,包括荧光、磁共振、超声和X射线,有时也可以相互结合使用。在所有情况下,目的都 ...
本包括固定和活细胞、组织切片和类器官。合适的照明系统对于高质量的定量显微镜是必不可少的。我们需要的光源要稳定、明亮、可预测,而且要在广谱范围内呈现多色。Lumencor的SPECTRA光引擎提供的多谱线照明满足了我们高通量显微镜所需的稳定照明。它非常适合匹配我们的滤波片。采集的图像通过我们自己开发的管线进行量化。如果我能设计我的理想的光源,它会有尽可能多的离散激光器,用于从360nm到750nm的多路复用成像。它会提供覆盖钙成像、标准共聚焦和高度多重成像需求的激发。它会解决需要成像多种荧光团的问题。我们期待Lumencor提供zui优xiu的照明,以支持我们非常苛刻和广泛的显微镜成像需求。来自 ...
别有用,例如活细胞或小生物体,这些样品很难用其他技术看到。4、可用于多种样品:暗场显微镜可用于范围广泛的样品,包括生物、矿物和材料科学样品。总的来说,暗场显微镜对于希望研究透明、低对比度或难以用其他技术观察的样品的研究人员来说是一种有价值的工具。它可以提供高对比度、高分辨率的图像,帮助研究人员更好地了解样本的结构和特性。暗场显微观察是一种利用倾斜照明改善常规照明条件下成像质量不佳标本对比度的技术。直射光被聚光镜内的不透明光阑阻挡后,从倾斜角度穿过样品的光线经过衍射、折射并反射到显微镜物镜内,形成叠加在深色背景上的明亮样品图像。这种深色背景能够提供较高的对比度,并且轻松让背景效果不佳的标本更加突 ...
展示了分选后活细胞的收集。虽然在这项工作中,通量是中等的,但通过仔细优化设备参数,使用更宽的设备,更大的柱间距和并行化,相信可以将通量提高到详细的生物分子研究所必需的水平。如果您对Lumencor白光光源有兴趣,请访问上海昊量光电的官方网页:https://www.auniontech.com/details-1803.html更多详情请联系昊量光电/欢迎直接联系昊量光电关于昊量光电:上海昊量光电设备有限公司是光电产品专业代理商,产品包括各类激光器、光电调制器、光学测量设备、光学元件等,涉及应用涵盖了材料加工、光通讯、生物医疗、科学研究、国防、量子光学、生物显微、物联传感、激光制造等;可为客户 ...
能性允许分析活细胞,这意味着科学家们就可以完整而又准确的监测动态细胞过程,而这是基于 AOTF 系统所允许的快速光强与波长切换功能。荧光漂白后恢复(FRAP)、荧光漂白损失(FLIP)和用户定义的小标本区域(感兴趣的ROI区域)等技术已经取得了很大进展。逐像素波长和功率控制显微镜专家可以保持高扫描速率,同时逐像素调整图像。通过为每个波长和激光分配不同的光强来实现不同信号电平的平衡。AOTF的一个用途是选择特定的激发波长并设置白光激光器的功率。此外AOTF还可以与激光多路复用技术相结合。AOTF通过选择系统中的激光源并控制其强度来控制波长和光强。声光效应允许快速并精确地控制传输和波长选择。这样A ...
用单细胞阵列活细胞成像(LISCA)来监测mRNA阳离子脂质转染后GFP表达的起效和速率。将单细胞排列在微图纤连蛋白基底上(图1A),与mRNA-脂质复合物培养1小时,然后通过延时荧光显微镜监测20小时(图1B)。为了使GFP荧光真实地展现蛋白质表达水平,稳定且可重复的激发光源至关重要,这使得SOLA光引擎成为该应用的理想高性能照明光源,并且低热量与低噪声也便于获得更加优质的图像信息。除了表征起效时间和蛋白表达速率的显着细胞间变异性(图1)外,LISCA还用于确定血清蛋白对不同mRNA-脂质复合物制剂的细胞摄取的影响。图1:(A)单个GFP表达的HuH7细胞排列在微图纤连蛋白上。(B)代表GF ...
, 而且对于活细胞成像等对时间敏感的实验来说往往是不够的。”为了克服这些限制, 华盛顿大学的科研人员使用第三束激光束来同时对两个间隔很宽的光谱区域进行成像, 例如一个在指纹区域大小(比如. ~1600 cm-1应对酰胺振动)和一个在C-H区域大小(比如. ~2900 cm-1应对蛋白质), 但这会增加实验设置的占用空间和复杂性。图2:用Moku:Pro多仪器并行模式设置在间隔较远的拉曼转换处拍摄的HeLa细胞SRS图像。解决方案在采用调制传输检测方案的 SRS 显微镜实验中,高质量的锁相放大器是关键的硬件组件。Moku:Pro 的锁相放大器为 SRS 显微镜实验中的自外差信号检测提供了一种直观 ...
,即使它们对活细胞成像不够快,但它们构成了拉曼光谱许多其他应用的合适替代品。在第二种策略中,通过使用不同的拉曼模式来增加拉曼信号的强度,这反过来允许更短的捕获时间。在脑生理病理研究中,与自发拉曼相比,常用三种模式来提高信号强度:非线性拉曼散射技术,如受激拉曼散射(SRS)和相干反斯托克斯拉曼散射(CARS),以及表面增强拉曼散射(SERS)。图1在拉曼散射的非线性模式中,使用多个激光刺激特定的振动跃迁,从而增加信号的强度。简单地说,在SRS中,样品用自发拉曼中的“泵浦”激光照射,并结合较低频率的“斯托克斯”激光。斯托克斯激光器频率的选择使两种激光器之间的能量差(∆v)与特定振动跃迁的能量差相似 ...
相干拉曼显微系统的发展中遇到的新挑战尽管CRS具有非常理想的成像特性,但生物医学成像界对该技术的采用一直是一个缓慢且看似漫长的过程。CRS方法主要由一群敬业的开发人员推动,开始进入大学成像设施、神经科学实验室和临床环境。到本世纪末,CRS显微技术的商业化似乎有了足够的动力。第一个打入市场的CRS成像系统是由奥林巴斯生产的,几年后又由徕卡微系统公司生产了专用的相干反斯托克斯拉曼散射(CARS)显微镜。人们希望CRS显微镜技术能够扩展到生物成像的其他领域,并且该技术能够作为生物研究的常规工具占有一席之地。尽管令人印象深刻的研究表明,CRS可以映射脂类以外的各种生物化学化合物,但该方法并没有轻易摆脱 ...
感的实验(如活细胞成像)来说往往不够。应对这一挑战的另一种解决方案是引入第三束激光束来扫描不同的拉曼过渡区域。这种能力对于两个光谱区域的同时成像特别有吸引力:一个在指纹区域(例如 约1600 cm-1用于酰胺振动)和一个在CH区域(例如 约2900 cm -1蛋白质)。在 SRL 成像方法中,实验装置由一个斯托克斯光束和两个不同波长的泵浦光束组成。此设置的常用检测方法需要单独的检测器和单独的 LIA。然而,Moku:Pro 的多仪器模式允许部署多个LIA,因此可以在不需要任何额外硬件妥协的情况下实施第二个LIA。图 5:Moku:Pro 多仪器锁相放大器配置图 5 演示了LIA 的多仪器模式设 ...
或发出荧光的活细胞等现象。与所要求的亮度相应的辐射水平会引起物体不可接受的升温。如果图像信号因为高帧率而变得太低了怎么办?相机噪声将是一个额外的问题。幸运的是,对于这些问题有一个高科技的解决方法:像增强器。在图像投影到高速相机的图像传感器之前,使用增强器来增强图像。增强后的图像所产生的传感器信号通常比不使用像增强器时高10000倍——在这个过程中,信号高于相机的噪声水平。像增强器是如何工作的?像增强器是一个真空管,输入端为光电阴极,中间为微通道板(MCP),输出端为荧光屏,如图1所示。光子的处理过程如下:1.图像被投射到光电阴极上。光电阴极将入射的光(光子)转换成电子。电子在真空管中发射,并在 ...
的主要优点是活细胞可以在其自然状态下进行检查,而无需事先被杀死、固定和/或染色。 Zernike contrast 允许样品界面的可视化,但横向分辨率相对较差,并且伪影的出现妨碍了任何正确的定量相位测量。Nomarski 对比(或 DIC 用于微分干涉对比)显微镜是一种更流行的相位成像技术,可在一个方向上提供样品相位梯度。图像呈现的输出强度是振幅和相位梯度对比与对样本中光路长度梯度的非线性响应的混合。标准 DIC 系统本质上大多是定性的。这就是为什么一些研究项目提出将相移方法应用于DIC来获取线性相位梯度图像。特别是,已经提出了一种结合相移、两个剪切方向和使用改进的螺旋相位的傅里叶空间积分的方 ...
无需扫描! SPINDLE可实现3D高精度单分子定位成像!介绍超分辨率显微成像是一系列能够使研究人员能够“打破”光学显微镜衍射障碍的方法,在该系列方法中分辨率最高的技术为光激活定位显微技术(PALM)。这些方法依赖于在数千帧中对单个分子的随机子集进行定位(SMLM),并将这些个体的定位重构为单个超分辨率图像。传统的定位显微镜可以在横向维度上进行10~20nm的精确成像,为了实现更高的定位精度,要求显微镜配置具有更高信噪比的灵敏探测器。尽管横向分辨率令人印象深刻,但传统的2DSMLM仍通常缺乏轴向分辨率。美国DoubleHelixOptics公司的SPINDLER系列3D显微镜成像模块与3DTR ...
观察厚标本、活细胞、定点光漂白实验上起着积极的作用。随着科学技术的发展和社会的进步,人们对仪器设备的各项性能提出了更高的要求,科技工作者也投入于研发新产品和新技术。在国家自然科学基金委重大科研仪器研制专项“超高时空分辨微型化双光子在体显微成像系统”的支持下,由北京大学分子医学研究所牵头,联合北大信息科学技术学院电子学系、工学院以及中国人民解放军军事医学科学院等组成的跨学科团队,推出了第二代微型化双光子显微镜。2021年研发团队在《Nature Methods》上发表了题为《Miniature two-photon microscopy for enlarged field-of-view, m ...
典型应用案例活细胞成像生物对环境条件的变化,尤其是温度的变化非常敏感。VAHEAT保证了传输和成像过程中可靠和精确的温度控制。研究细胞行为的温度敏感过程,如多细胞肿瘤球体中的Ca2+活性或神经元的热刺激从未如此容易。充分发挥VAHEAT作为微舞台顶级孵化器的能力。视频链接:https://interherence.com/wp-content/uploads/2020/11/Live-Cell-Imaging-Vid.m4vDNA根据序列和链长不同,双链DNA的熔点可在60°C至90°C之间。使用高分辨率显微镜观察靠近熔点甚至高于熔点的DNA动力学,在传统的加热阶段尚不可能。VAHEAT为从光 ...
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