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为它直接使用近红外飞秒激光生成可见光区域的可观测的非线性信号。近红外光相比可见光,具有更大的组织穿透深度(生物组织光散射的减少,正比于激发波长的四次方)。原理简介:(1)当同时到达样品上的两个或更多的光子的能量之和满足荧光基团从基态跃迁到激发态的能量要求时,多光子激发发生。荧光信号可以是进入生物样品的外源探针(Hpechst,AlexaFluor488等),也可以是内源分子(NAD(P)H或逆转录荧光蛋白)。(2)多光子成像对二次谐波(Second harmonic generation, SHG)生成敏感,即两个光子瞬间将它们的能量转移到一个波长减半的光子上。二次谐波生成不需要荧光基团,但要 ...
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