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素均匀染色的脑切片中。c,使用全NA照明和蓝色激光刺激并收集大大脑区域荧光的系统示意图。收集的光在贴片光纤中反向传播,并通过一个二色镜将其导向PMT与蓝光区分开来。L1和L2,晶状体;BPF,带通滤波器;Fluo,荧光信号;Exc,激发光。d,定点照明将采样体积限制在锥形光纤的子区域。左,集光域ξT(x,y);中心,在光纤尖端选择性照明得到的光度效率场ρT(x,y);右,ρT(x,y)视场是在较宽锥度直径下选择性照明获得的。e,提出的多站点光度测量系统的原理图,该系统使用时分复用配置的PMT探测器。蓝色激光束以增加的输入角(θ1, θ2)射入光纤贴片线。低角度注入时,激光在锥尖处耦合,产生荧光 ...
最近,在大鼠脑切片中结合拉曼显微镜和傅里叶变换红外显微光谱证实,病变部位的胆固醇水平升高。与此同时,与蛋白质相关的拉曼信号增加,磷脂信号减少。在用氘和炔标记生物正交标记的大鼠海马切片培养中得到了相同的总体结果。使用标记的DNA、RNA、蛋白质和脂类类似物,蛋白质水平增加了3倍,棕榈酸水平增加了10倍,表明细胞修复机制被激活。全脑或脑切片的拉曼成像是建立脑外伤期间代谢变化的一个很好的工具。然而,这并不是一种适合监测病人的方法。为了有效的预后,必须开发低创或无创技术。在这方面,拉曼光谱最近被应用于小鼠TBI模型的视网膜。来自视网膜的光谱可以区分中度和重度TBI,并且记录了眼睛中类似于在大脑中观察到 ...
增强新皮层大脑切片神经元动作电位双光子钙成像的速度和灵敏度,证明了DOE扫描的优势。DOE扫描可以很容易地提高双光子和其他非线性显微技术对时变信号的检测。我们将一个DOE放置在与物镜和检镜后孔径共轭的平面上(图1A)。这个元件在光程中被望远镜跟随,这是确保从DOE出现的小束也在检镜处重新连接在一起所必需的,允许每个单独的小束保持准直,并微调-小束传播的角度。当使用偶数量的波束时,我们通过机械阻塞消除了零级波束。虽然从DOE发射出的每个小束都与射入DOE上的激光束的直径相同,但随后的望远镜产生了一个副作用,即每个小束的大小与望远镜的功率成正比。因此,我们用另一台望远镜预先缩小或预先扩大入射激光。 ...
可以同时激发脑切片中的多个神经元。在那项工作中,Yuste同时在几十个神经元中成像并检测动作电位,帧频为66 Hz。这对于神经科学界来说是一个重大进步,但是当时Yuste可用的SLM限制了这项工作。这项工作推动了先进的SLMs的发展,以提高分辨率以最大化可研究的大脑的体积,改善功率处理以增加一次可照亮的神经元的数量,并且提高液晶的响应时间,使得激励时间可以匹配神经电路动态过程。Meadowlark Optics(MLO)公司最新的HSP1920型SLM分辨率从512 x 512像素提高到1920 x 1152像素,同时在1064 nm处达到300 Hz的液晶响应时间(0-2π)和845Hz的帧 ...
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