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组件如何改变共聚焦显微镜Lars Sandström在这篇文章中讨论了如何在共聚焦显微镜中使用声光偏转器(AOD)来解决传统共聚焦和多光子显微镜技术的的一些局限。老鼠海马体中的位置细胞(青色)及其中间神经元的局部回路(深蓝色)。由Tristan Geiller/Losonczy实验室/哥伦比亚的Zuckerman研究所提供。共聚焦显微镜使用CW激光束,将其聚焦到含有荧光染料或蛋白质的组织样本内的一个小束腰上(微米级宽度)。所产生的荧光穿过显微镜物镜,然后聚焦在位于高增益光电探测器前面的针孔上。这个共聚焦孔阻挡了任何不是来自激光束腰的xyz位置的光。通过扫描束腰和/或移动样品,可以获得水平或垂直 ...
F)如何增强共聚焦显微镜的多功能性声光可调谐滤波器(AOTF)可以为共聚焦显微镜提供更加清晰的图像、逐像素波长的灵敏性以及精确的控制。Gooch & Housego(G&H)的生命科学部门副总裁Lars Sandström探讨了声光可调谐滤波将来的技术发展,以及如何进一步增强共聚焦显微镜在生命科学领域的多功能性。共聚焦显微镜,也称为共聚焦激光扫描显微镜(CLSM),在生命科学领域已经应用了数十年。从眼科到神经科学,共聚焦显微镜支持拯救生命相关的诊断、治疗和研究。如今,共聚焦显微镜的生物医学应用越来越依赖于声光可调滤波器(AOTF)。AOTF技术在精确控制、灵敏性和速度方面均有提 ...
用SPAD 23在共聚焦显微镜中实现波动对比度的超分辨率在过去的 20 年里,远场光学显微镜已经跨越了以阿贝衍射极限为代表的一度难以逾越的分辨率障碍 ,开发多种成功的方法,如受激发射损耗(STED) 、单分子定位方法(PALM 和 STORM) ,结构照明显微术(SIM)和超分辨率光学波动成像(SOFI),这要归功于图像传感器技术的改进以及单分子光谱学的巨大进步。在这里,我们提出了一种新的显微技术,它利用 SPAD23阵列探测器的超高时间分辨率来测量荧光波动引起的相关性。在 ISM 架构中测量的这种相关性,然后被用作具有高达 4倍增强横向分辨率和增强轴向分辨率的超分辨率图像的对比度。仅用几毫秒 ...
导到自制光学共聚焦显微镜的激发路径上。另外两条激光线已经出现在设置中。该装置被用于不同的项目,因此它有几个光学组件,以允许更大的灵活性。FYLA SCT是一种1W脉冲超连续皮秒光纤激光器,具有非凡的平均功率稳定性,提供从450 nm到100 nm的广泛光谱2300nm范围内,可见平均功率超过30mw。FYLA的技术规格SCT使其成为研究单个分子的完美激光金属纳米粒子存在时的荧光。如果您对超连续激光器有兴趣,请访问上海昊量光电的官方网页:https://www.auniontech.com/three-level-104.html更多详情请联系昊量光电/欢迎直接联系昊量光电关于昊量光电:上海昊量 ...
的数据采集。共聚焦显微镜通过对激发光进行空间限制来提供三维空间信息。因此,与宽场显微镜相比,共聚焦显微镜需要更高的初始光强。因此,在共聚焦显微镜的应用中,激光光源通常比LED更受青睐。超分辨率显微镜提供20-200nm范围内的空间分辨率,超出了宽视场荧光显微镜(~200nm)的限制。与共聚焦显微镜一样,需要空间受限的激发光,通常shou选激光光源。透射光学显微镜通常需要比荧光显微镜更低的光强,因此可以使用更小的被动冷却光源。多年来占主导地位的卤钨灯已经被固态显微镜光源所取代。很大程度上是相同的原因,固态显微镜光源在宽视场荧光显微镜也已经取代了汞弧灯。特别是,固态光源的光谱分布(色温)不随输出光 ...
的数据采集。共聚焦显微镜通过对激发光进行空间限制来提供三维空间信息。因此,与宽场显微镜相比,共聚焦显微镜需要更高的初始光强。因此,在共聚焦显微镜的应用中,激光光源通常比LED更受青睐。超分辨率显微镜提供20 - 200nm范围内的空间分辨率,超出了宽视场荧光显微镜(~ 200nm)的限制。与共聚焦显微镜一样,需要空间受限的激发光,通常shou选激光光源。透射光学显微镜通常需要比荧光显微镜更低的光强,因此可以使用更小的被动冷却光源。多年来占主导地位的卤钨灯已经被固态显微镜光源所取代。很大程度上是相同的原因,固态显微镜光源在宽视场荧光显微镜也已经取代了汞弧灯。特别是,固态光源的光谱分布(色温)不随 ...
成像技术(如共聚焦显微镜或双光子显微镜)结合使用等特点,近年来已经广泛应用于生物学、医学研究和生命科学等相关领域。那么,FLIM是如何实现如此强大的功能呢?FLIM的首要任务就在于测量荧光寿命(Fluorescence lifetime, FL),待测物体被一束激光激发后,该物体吸收能量后,从基态跃迁到某一激发态上,再以辐射跃迁的形式发出荧光并回到基态。将激发光关闭后,分子的荧光强度也将随时间逐渐下降。假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分别为Γ和Knr,则激发态衰减速率可表示为:其中n(t)表示时间 ...
使人们能够在共聚焦显微镜几何结构中测量时间分辨克尔磁光信号,空间精度为300纳米。在中心波长为790nm的Ti:蓝宝石再生放大器上,以5KHz的重复率提供持续时间为150fs的激光脉冲。部分光束用作泵浦光。光束的另一部分用于在1.5 mm厚的硼酸钡晶体中通过二次谐波产生395 nm的探测光束。使用孔径为0.65的物镜将两束光束共线聚焦在样品上。在孔径为20 μm的共焦平面上,测量了探头和泵浦光束的光斑直径d。dprobe≤300 nm, dpump≈400 nm。用交叉偏振片技术分析共焦平面后探头的极性克尔旋转。交叉分析仪的消光比<5x10-4。利用光电倍增管和锁相检测方案检测弱泵浦探头 ...
就是激光扫描共聚焦显微镜的工作原理。共聚焦显微成像技术的关键在于两个针孔的“共聚焦”可以屏蔽所有来自非焦面的信号,在探测针孔后的光电倍增管只能探测来自焦平面的信号。因此,该技术具有光学切片的能力。结语:共聚焦显微技术是近十几年迅速发展起来的一项高新研究技术,目前应用领域扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学、神经生物学、生理和病理学等学科的研究工作中,成为现代生物学微观研究的重要工具。更多产品信息请参考:https://www.auniontech.com/details-62.htmlhttps://www.auniontech.com/details-71.html更多详情请联系昊量光 ...
束本身,就像共聚焦显微镜中通常做的那样。交叉电流计驱动镜已用于此目的,声光翻译器也是如此。线聚焦和逐行扫描直线扫描提供了一种更快速的图像生成方法。在这种方法中,激光被聚焦在一条线上,通常用一个圆柱体透镜。因为透镜聚焦高斯光束到一个高纵横比,只有光束的中心部分是可用的。这一问题可以用鲍威尔透镜来解决,它可以将光束聚焦到一个均匀强度的高aspect矩形。在最流行的扫描配置中,线聚焦光束是静止的,物体在它下面平移。不太常见的是,线聚焦光束扫描静止物体。从逐点扫描的总测量时间的减少是显著的,因为同时获得100或更多的光谱。获得这些光谱的测量时间可能比点聚焦激光测量单个光谱的时间短,也可能只长一点。原因 ...
键优势。•在共聚焦显微镜和其他图像应用中用作快速偏转器。使用声光器件的共聚焦显微系统英国Gooch&Housego(简称”G&H”、古奇)是一家光电科技公司,总部位于英国Ilminster Somerset,业务遍及美国和欧洲。作为该领域的世界领导者,该公司研究、设计、制造先进的光学系统、组件和仪器,应用于航空航天与国防、工业、生命科学和科研部门。世界领先的设计、开发和制造的专业知识提供广泛的补充技术;G&H是世界领先的工业激光器Q开关和AOM制造商,供应全球工业激光 制造商超过15年,例如: Trumpf, IPG Photonics, Rofin,Coherent, New ...
件采用类似于共聚焦显微镜的聚焦设计。它们的激发光束和拉曼信号光束都集中在同一个点上。样品通常放置在这个焦点上,在激光焦点处有一个小的高功率密度的采样区域。通过这种方式,激发功率密度和拉曼信号辐射在采样体积最大化,并且只有来自这个紧密聚焦的体积的信号被收集。这种共聚焦设计具有最大的吞吐量的优势,可以用于测量透明容器内的样品,就像共聚焦显微镜做光学切片一样。当容器强烈地漫射光时,共聚焦方法失去了它的效力,因为光不能再聚焦到容器内的材料上。扩散散射容器内材料的拉曼信号较弱,通常伴随容器本身的强特征。STRaman®技术扩展了拉曼光谱的能力,以测量漫射散射包装材料下的样品-允许在不透明包装和透明层中的 ...
合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术一种新技术。为了不损伤细胞,双光子显微镜使用了高能量锁模脉冲激光器,因该激光器具有很高的峰值能量和很低的平均能量,其脉冲宽度只有100飞秒,而其频率可以达到80至100兆赫。不仅如此,双光子显微镜检测效率高、易穿透标本、对细胞毒性小、只在焦平面上才有光漂白和光毒性,这也使得显微镜在观察厚标本、活细胞、定点光漂白实验上起着积极的作用。随着科学技术的发展和社会的进步,人们对仪器设备的各项性能提出了更高的要求,科技工作者也投入于研发新产品和新技术。在国家自然科学基金委重大科研仪器研制专项“超高时空分辨微型化双光子在体显微成像系统”的支持下,由北京大学分子医学研 ...
流体,以使用共聚焦显微镜准确成像界面位置。如图2所示,电界面是由最左(绿色)1xPBS溶液(σ1=0.29mS/cm;ε1=78)与10ng/mL的Alexa流体488(Invitrogen)构成的。最右边(红色)高介电流(σ2=19μs/cm;ε2=110)由0.8M6-氨基己酸(西格玛-奥尔德里奇)(AHA)组成,标记有10ng/mL的Alexa流体594(Invitrogen)。AHA是一种水溶性两性离子,用于增加水溶液的介电常数。在荧光标记之前,用1g/mLDowexMr-3(Sigma)离子交换树脂抛光AHA溶液,以去除微量盐并降低溶液的电导率。使用先前发表的方法测量了该电解质系统的 ...
4NA),用共聚焦显微镜从室温到100°C成像珠子的PSF。在没有浸没介质的情况下工作时,球面像差最小。4、快速且可靠(油浸系统)VAHEAT可以让你控制视野内的温度,独立于显微镜物镜的类型或物镜的温度。该系统被设计为独立的单元,不需要对光学设置(如物镜加热器)进行任何额外的修改,以避免在您的视野中出现温度下降。此外,我们的智能基板的特定设计确保了目标的性能即使在更高的温度下也不会改变。5、4种加热模式VAHEAT设有四种加热模式,可根据您的需要进行不同的实验。模式快速加热,自动补偿加热,或定义良好的温度剖面是可用的。6、机械稳定性和设备兼容性没有热漂移或振动,即使在高温下也允许精确的单分子定 ...
,提供旋转盘共聚焦显微镜、空间分辨转录组学和其他高级成像应用所需的高性能照明。图2 CELESTA 光源(2)LED光源:4、5 或 6 个固态照明光源同时工作以产生白光,多种型号可选,光纤输出或液体光导输出。图3 SOLA光源及其光谱图4 PEKA光源及其光谱(3)其他光源图5 MIRA光源及其光谱图6 AURA光源及其光谱相关文献:1.Cheng, Yubao, et al. "TAD-like single-cell domain structures exist on both active and inactive X chromosomes and persist und ...
像素的点扫描共聚焦显微镜快得多。由于三个关键特性,光片荧光显微镜正成为体积成像最流行的技术之一:1.激发点被限制在焦平面附近,光损伤被最小化,生物可以存活更长的时间;2.容易获得良好的光学切片,通常接近共聚焦显微镜;3.采集速度非常快,比传统的共聚焦显微镜快几个数量级。从本质上讲,光片显微镜通常基于荧光技术,一般来说,研究中的样品需要正确标记才能成像。使用弹性散射光可以生成未标记样本的图像,但目前主要的障碍是这些图像通常受到散斑的影响。为了解决这个不便,Pablo Loza-Alvarez, Omar Alarte, David Merino of ICFO-Institut de Cienc ...
被用于通过共聚焦显微镜对酵母中的温度敏感等位基因进行热休克和活细胞成像2。VAHEAT 还被用于在 Henrik Dietz 教授(慕尼黑工业大学)的实验室中使用 DNA 折纸创建人工大分子传输的研究。该研究使用单分子 TIRF 成像进行检测3。使用即插即用的 VAHEAT 系统,从实验中导出温度记录也非常简单。因此,我们希望该设备不仅能够实现新型实验,而且有助于改进成像实验的报告和可重复性,从而为每个人提供高灵敏度显微镜。关于Interherence:德国Interherence公司拥有量子和生物光子学领域的专家团队,为高灵敏度光学显微镜的发展做出很大贡献。该团队采用了现代纳米制造和薄膜技 ...
1436Hz纯相位空间光调制器在双光子/钙离子成像中的应用一、引言双光子成像是利用双光子吸收的一种成像技术,双光子吸收是指原子或分子在时间和空间上同时吸收两个光子而跃迁到高能级的现象。因此反应概率远小于一般的单光子吸收,它的几率正比于光强度的平方。神经元钙成像(calcium imaging)技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示剂,calcium indicator),将神经元当中的钙离子浓度通过双光子吸收激发的荧光强度表征出来,从而达到检测神经元活动的目的。美国Meadowlark Optics公司专注于模拟寻找纯相位空 ...
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