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显微镜的分辨率和有效放大率

发布时间:2023-09-28 11:49:39 浏览量:1151 作者:Joe

摘要

由于衍射现象的存在,即使是理想光学系统对一个几何点成像时,也只能得到一个具有一定能量分布的衍射图形。按瑞利判据,一个点的衍射像中心正好与另一点的衍射像的第1暗环重合时,是光学系统刚好能分辨开这二点的zui小界限。显微镜的分辨率,对于一定波长的色光,在像差校正良好的情况下,完全被物镜的数值孔径所决定。数值孔径越大,分辨率越高。而为充分利用物镜的分辨率,使已被物镜所分辨的物体细节能被眼睛看清,显微镜必须有恰当的放大率,以便把细节放大到足够使人眼能分辨的程度。

正文


显微镜的分辨率和有效放大率


由于衍射现象的存在,即使是理想光学系统对一个几何点成像时,也只能得到一个具有一定能量分布的衍射图形。按瑞利判据,一个点的衍射像中心正好与另一点的衍射像的第1暗环重合时,是光学系统刚好能分辨开这二点的zui小界限。从波动光学原理可知,自身发光的点被理想系统所成的衍射像,其第1暗环半径对出瞳中心所张的角度,即正好能被此系统分辨得开的二个点的极限分辨角。 D为系统入瞳直径。该式虽得自远场衍射,但在物距与光瞳直径相比大得多时也能适用。显微物镜像空间是符合此条件的。


显微镜的分辨率以物面上能被物镜分辨开的二点之间的zui小离表示。如下图1所示,对应的两像点之间的距离应等于其中任一个衍射斑的第1暗环的半径,再考虑到像方孔径角很小,有


由于显微物镜总满足正弦条件,且,故可得zui小分辨距为



图1


但是,据以导出此式的基本公式只对两个非相干的自身发光点是正确的。但在显微镜中,被观察物体系被其他光源所照明,使物面上相邻各点的的光振动是部分相干的,受此影响,式1中的数字因子将略有不同。根据参考资料,该数值因子将在0.57至0.83范围内变化。根据阿贝研究,在对物体作斜照明时,zui小分辨距为



从以上讨论可见,显微镜的分辨率,对于一定波长的色光,在像差校正良好的情况下,完全被物镜的数值孔径所决定。数值孔径越大,分辨率越高。这就是显微物镜什么要有尽可能大的数值孔径的原因。当显微镜物方介质为空气时,物镜的极限数值孔径1,一般zui大只能做到0.9左右。在物与大数值孔径物镜之间浸以液体,可提高数值孔径。常用的液体有折射率为1.5左右的香柏油和某些更高折射率的液体,后者可使数值孔径达到1.5。由于数值孔径只能在1左右变动,光学显微镜的极限分辨距与所用色光的波长同一数量级。

浸液物镜需要把浸液作为物方介质来专门设计。

为充分利用物镜的分辨率,使已被物镜所分辨的物体细节能被眼睛看清,显微镜必须有恰当的放大率,以便把细节放大到足够使人眼能分辨的程度。分别取2’和4’为人眼分辨角的下限和上限,则人眼在明视距离处能分辨开二点的间距即为被显微镜放大以后的像,有


对于目视光学仪器,主色光的波长为0.00055,则


500A < M <1000A


满足此公式的放大率称为显微镜的有效放大率。可见,该有效放大率被物镜的数值孔径所决定,即数值孔径须与放大率相匹配。由于浸液物镜的zui大数值孔径可达1.5,故光学显微镜所能达到的zui高有效倍率1500倍。不考虑数值孔径而盲目加大物镜或目镜的倍率是无效放大,不但没有好处,反而会因对物体的细节的不真实反映而造成判别的错误。


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相关文献:
《几何光学 像差 光学设计》(第三版)——李晓彤 岑兆丰


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