拉曼光谱中荧光抑制方法的主要类别拉曼光谱在大多数应用中的一个严重问题是强荧光背景,这部分归因于拉曼光谱的低截面散射。在激光激发下,荧光与Stokes Raman散射同时发生,因为红移的Stokes Raman散射与荧光发射光谱重叠。反斯托克斯拉曼散射不存在荧光问题,因为与激发波长相比,反斯托克斯拉曼散射是蓝移的,因此在光谱中与荧光自然分离。当用可见光激发时,荧光本底问题更为严重。拉曼光谱中的强荧光信号直接影响拉曼测量的准确性和灵敏度。荧光和自发拉曼信号在波长维度上重叠,因此不能用简单的滤光片分离。幸运的是,它们在以下性质上有所不同,这是许多拉曼测量中荧光抑制方法的基础:1.荧光发射寿命(纳秒量 ...
抑制荧光的时域拉曼光谱技术图1显示了激发激光脉冲、发射拉曼散射信号和发射荧光的时间轮廓。荧光过程包括激发、内部转换和发射三个重要步骤,每个步骤都发生在不同的时间尺度上。首先,入射光子激发荧光团分子的时间为飞秒(10-15秒)量级。其次,振动弛豫的无辐射内转换过程也非常快,在10-14 ~ 10-11 s之间。最后,荧光发射是一个缓慢的过程,大约发生在10-9-10-7 s左右。荧光寿命是指分子在发射荧光光子前处于激发态的平均时间。图1所示的指数衰减曲线说明了荧光发射时间的统计分布。单荧光团的荧光时间轮廓符合寿命常数τ的指数函数,而拉曼发射几乎与激发激光同时发生。由于拉曼信号比荧光信号的发射速度 ...
算的,尤其在荧光应用领域广泛)。45 mm的齐焦设计可以在Z短光程的基础上实现高分辨率,高视场亮度的效果。4.工作距离物镜的工作距离是指显微镜准确聚焦至样品表面后,待测样品表面与物镜的Z前端表面之间的距离。物镜的放大率越高,工作距离越短。使用时,待测样品应位于物镜的一到二倍焦距之间。因此,它和焦距是两个不同的参数,显微镜调焦的步骤实际是在调节物镜的工作距离。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短,孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。5.分辨率分辨率是指能清晰的分辨待测样品表面两点间的Z小距离,通常用d表示。分辨率决定了显微镜分辨样品上细节的程度。显微镜的物镜是使物体放大成实像,目镜 ...
实现时间分辨荧光光谱需要记录激光脉冲激发后发射光随时间变化的强度分布。理论上可以记录单个激发-发射循环的信号的时间衰减曲线,但在实际应用中还存在着许多问题。首先,要记录的时间衰减非常快,比如普遍使用的有机荧光团的光致发光过程仅持续几百皮秒到几十纳秒;另外不仅要获取荧光寿命,还要还原荧光衰减曲线形状,通常为了解决多指数衰减,必须能够在时间上将记录的信号解析到这样的程度:由几十个样品进行衰减。使用普通的电子瞬态记录仪很难达到所需的时间分辨率。 另外如果发射的光太弱则无法产生代表光通量的模拟电压。 实际上光信号可能只有每个激发/发射周期的几个光子。 然后信号本身的离散特性导致无法进行模拟采样。 即使 ...
率以快速获取荧光衰减直方图,比如在要研究动态寿命变化或快速分子转变或必须收集大量寿命样本(例如二维扫描成像)的情况下,这可能特别重要。PMT(取决于设计)可以处理高达每秒 1 到 20 百万次计数 (cps) 的计数率。基于老式 NIM 的 TCSPC 电子设备最多能够处理 50,000 到 500,000 cps。采用现代集成 TCSPC 设计,例如 TimeHarp 260,可实现高达 40 Mcps 的计数率。韩国Nanobase 共聚焦光路结合PicoQuant单光子计数技术可实现高效率荧光寿命成像。您可以通过我们的官方网站了解更多的产品信息,或直接来电咨询4006-888-532。 ...
出现了很强的荧光背景,这进一步表明了注入过程中强有力掺杂效应。再去除外加电压之后,石墨烯表面出现了和原始样品相似的拉曼光谱。图1. 离子液体注入多层石墨烯器件的原位拉曼测试:(a)原位拉曼测试过程图解;(b)在不同偏压下表面多层石墨烯的拉曼光谱;(c)原始(黑色)、注入(红色)和非注入(蓝色)的多层石墨烯表面的拉曼光谱图如图2所示,多层石墨烯在插入偏压的薄层阻抗通过四点电阻率法来测试,石墨烯层之间弱的范德华力允许原子或小分子注入到范德华间隙中。在此种情况下,离子液体中的阳离子/阴离子在偏压下注入层中,结果石墨烯上的电荷密度显著增加并且多层石墨烯的薄膜阻抗在低于2V从11Ω显著降低到高于3.5V ...
器双光子激发荧光(TPEF)显微镜,也称为双光子显微镜,是对活体组织深层三维成像的第1方法。深度成像是TPEF显微镜固有的优势,它使用了更长的激发波长(通常是近红外波段),因而其带来的散射比传统共聚焦显微镜中所使用的较短的可见波长更少。更长的波长同时也减少了来自散射光的背景照明,并增加了在更高深度处的对比度。目前,用TPEF显微镜可以获得1mm深度的体内大脑图像。在荧光显微镜中,当两个独立的光子被一种介质同时吸收时,就会发生双光子激发。这需要两个合适能量的光子在这样的介质上时间和空间上同时重合;通常来说这不需要非常大的激发光子通量,当然光子通量越大, 双光子同时被吸收的概率就越大。在TPEF显 ...
金相显微镜或荧光镜检法。1. 透射式照明透射式照明方法按照其光轴方向又分中心照明和斜射照明两种形式:(1) 中心照明:中心照明是最普遍的透射式照明法,其特点是照明光束的中轴与显微镜的光轴同在一条直线上,一般从待观察样品的正下方入射。它又分为临界照明和柯勒照明两种。图1.临界照明临界照明:如上图1,临界照明的光源经聚光镜聚焦后成像在待观察样品上,光束狭而强,这是它的优点。但是光源的灯丝像与被检物体的平面重合,这样会造成待观察样品表面的照明不均匀,在有灯丝像的部分照明比较亮;无灯丝像的部分照明就较为暗,不仅会影响成像的质量,更不适合显微照相,这是临界照明的主要缺陷。针对上述问题的解决方法是在光源的 ...
,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示剂,calcium indicator),将神经元当中的钙离子浓度通过双光子吸收激发的荧光强度表征出来,从而达到检测神经元活动的目的。美国Meadowlark Optics公司专注于模拟寻找纯相位空间光调制器的设计、开发和制造,有40多年的历史,该公司空间光调制器产品广泛应用于自适应光学,散射或浑浊介质中的成像,双光子/三光子显微成像,光遗传学,全息光镊(HOT),脉冲整形,光学加密,量子计算,光通信,湍流模拟等领域。其新推出的HSP1K(1024x1024)SLM系列的高刷新速度、高损伤阈值、大通光孔面的特性十分适用于双光子/多光子/钙离子成 ...
NA 检测、荧光生化检测、工业标示、科研、激光显示等领域有重要的需求和应用。其中,532nm最为常见。而532固态泵浦激光器的工作过程一般如下:1.808nm半导体激光器作为泵浦光源。2.808nm入射Nd YAG晶体,产生1064nm基频光。3.1064nm基频光经过倍频晶体,经过非线性效应倍频之后,波长减半,频率加倍,产生532nm绿光。您可以通过我们昊量光电的官方网站www.auniontech.com了解更多的产品信息,或直接来电咨询4006-888-532,我们将竭诚为您服务。 ...
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