区窗口多光谱荧光成像引导的首次人类肝脏肿瘤手术技术背景：近红外I区荧光成像在临床应用中很有前景。近红外I区窗口（NIR-I，700-900 nm）中的荧光成像相较于其它成像方式有许多优点，其中，高空间和时间分辨率尤为突出。它已被视为一项强大的技术，并有望在各种临床场景中发挥重要作用，例如，术中荧光图像引导和诊断成像等。除了亚甲蓝、荧光素钠和吲哚菁绿（ICG）等几种常规小分子近红外染料被美国食品药品监督管理局批准用于临床常规使用外，许多靶向荧光分子探针也被开发出来并正在进行临床评估，例如叶酸受体α靶向荧光探针叶酸-FITC、c-MET靶向光学探针GE-137和表皮生长因子受体靶向探针Cetuxi ...
光束+双光子荧光实现高时空分辨率在体体积成像技术背景：活生物体的生物过程成像需要具有三维高时空分辨率率的光学显微成像手段。如，在体脑成像需要亚微米空间分辨率区分突触(synapses)、神经元用来通讯和协调活动(communicate and coordinate activity)的特定亚细胞结构等，以及亚秒级时间分辨率来追踪神经元活动。尽管在一个体积内(如跨同一神经元的树突)研究突触活动是常用的手段，但是仍然缺乏能以高时空分辨率对突触进行三维成像的方法。在体成像技术中，双光子荧光显微镜(two-photon fluorescence microscopy, 2PFM)是对大脑这样的不透明组 ...
例如宽视场、荧光或者非线性显微镜等等。用于显微镜的高效率激光在多光子、共聚焦甚至超分辨显微镜中，荧光效率主要取决于激发光的质量。Phasics AO方案能够优化激发光场，让所有光都聚焦在感兴趣的区域。Phasics的传感器分辨率相对比较高，测量的像差特征也更加完整，因此在自适应光学中有更好的效果。改善光镊和光活化SLM设备可以产生特定形状的光斑，用于控制细胞和分子。为了能够在产生最大的力量，光束应该全部聚焦在目标上。Phascis AO方案通过改善像差，能够校正显微光学元件、SLM以及激光自身像差。厚组织直接成像当样品需要通过比较厚的介质时，成像会比较模糊。Phasics提供了一种新的直接成像 ...
同位点的自发荧光，采用了 785 nm 光纤拉曼光谱。光纤拉曼光谱仪由具有 1 根激发光纤（纤芯尺寸：300 µm）的分叉光纤探头（Emvision LLC）和 785 nm 激光二极管（FC -785-350-MM2-PC-1-0-RM，RGBLase）作为激发源耦合到光纤探头的 1 根激发光纤，高通量光谱仪（XPE85-NIR，Nanobase）耦合到 7 根收集光纤探头和热电 (TE) 冷却电荷耦合器件 (CCD)相机（iDus 401 BR-DD，Andor）获取通过光谱仪的斯托克斯-拉曼散射光子。拉曼光谱的校准是通过使用汞氖 (Hg-Ne) 校准源实现的。我们间隔不同培养时间分别从患 ...
子三光子激发荧光、二次和三次谐波生成、相干拉曼反斯托克斯散射）可用作对比机制，以提供生物样品的补充信息。在相干非线性显微镜中，信号和散射方向由激发场分布和样品微观结构之间的相互作用产生，因此，定量图像解释需要建模描述。当前不足：现有的基于角谱表示（ASR）计算聚焦点附近的激发场分布，基于格林函数（Green）将非线性响应从聚焦区域传播到探测器平面的模拟策略及已建立的大多数数值模型忽略了焦点附近样品光学异质性引起的场的失真的影响。解决方案：巴黎理工学院的Josephine Morizet和Nicolas Olivier等人将有限差分时域（FDTD）方法（FDTD已被用于模拟宽场、共聚焦、相衬等多 ...
能量之和满足荧光基团从基态跃迁到激发态的能量要求时，多光子激发发生。荧光信号可以是进入生物样品的外源探针（Hpechst,AlexaFluor488等），也可以是内源分子（NAD(P)H或逆转录荧光蛋白）。（2）多光子成像对二次谐波（Second harmonic generation, SHG）生成敏感，即两个光子瞬间将它们的能量转移到一个波长减半的光子上。二次谐波生成不需要荧光基团，但要求分子结构是高度有序和特别对称的。最常见的满足二次谐波生成的生物结构是胶原。（3）多光子成像是一种非线性的过程，信号产生要求功率密度达到MW/cm2的量级。如此量级只有在显微物镜的焦平面才可以达到，因而将可 ...
的温度下进行荧光标记实验以及膜片钳实验，而无需复杂笨重的孵化室。图 3：使用 VAHEAT 对空间限制下 60°C 和 70°C 生长的嗜热细菌进行成像图 4：使用 VAHEAT研究减数分裂过程中的染色体分离（酵母25- 37°C活细胞成像）图 5：VAHEAT 用于单分子 TIRF 测量中的精确温度控制（慕尼黑工业大学 Hendrik Dietz 的实验室用 DNA 折纸构建的大分子运输系统）图 6：使用 VAHEAT 表征金纳米粒子扩散常数的温度依赖性扫 码 预 约 试 用如果您对显微镜专用温控仪有兴趣，请访问上海昊量光电的官方网页：https://www.auniontech.com/d ...
吸收滤光片、荧光滤光片、中性密度滤光片、陷波滤光片等，不一一细举。常见滤光片参数详解（1）通带：能通过激光的波段范围。（2）带宽：不同于通带的概念，它是指通带范围内最大透过率一半位置处的波段范围。（3）中心波长：带宽的中心位置为中心波长或指滤光片在实际应用中所使用的波长。（4）透射率：对可透过波段的光的透射能力，透射率越大越好。（5）峰值透射率：滤光片损耗后能透过的最大值。（6）截止范围：通带之外的波段范围。（7）截止率：截止区所对应的透过率，透过率越小越好。（8）过渡带宽度：根据滤光片截止深度不同，指定的滤光片截止深度和透过率峰1/2位置处之间允许的最大光谱宽度。（9）斜率：通常描述边缘滤光 ...
时实现了快速荧光成像和相位成像。人们还探索了一些改进以提高 SPH 的性能，包括为压缩感知选择各种照明模式的适当顺序以及开发同轴干涉测量以提高鲁棒性。当前不足：（1）当前实现全息固有的相位步进（phase stepping）方法导致成像速度慢，从而通量低。（2）Lee全息图和超像素法都是以独立像素为代价实现的，因此减少了重建图像中有效像素的数量。（3）几乎没有报道将 SPI/SPH 应用于生物组织中的微观结构成像，这主要是由于成像系统的性能有限和生物样品的散射对比度相对较低。文章创新点：基于此，中山大学的Daixuan Wu(第1作者)和Zhaohui Li(通讯作者)等人提出了一种高通量的单 ...
曼信号通常被荧光辐射污染。通过对发射信号进行时间门控，可以将拉曼信号从荧光背景中分离出来:如果短脉冲光激发分子，拉曼信号在脉冲的脉宽范围内发射，而荧光的寿命更长。根据这个想法可得到无荧光的拉曼光谱。但是仪器变得更复杂，且由于通过门控系统和光谱仪不可避免的损耗，信号的幅值显著降低。此外通过光学元件，特别是光谱仪光栅的传输通常是偏振相关的。新的拉曼信号的采集和分析方法解决了这两个障碍:相对较弱的信号水平和不消失的荧光背景。通过将采集到的拉曼信号送入足够长的光纤中，拉曼峰可以被时间分离。通过将时间门控光电倍增管(PMT)与时间相关检测相结合，能够在时域内实现高灵敏度的信号检测。利用光纤的色散规律可以 ...
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