图像采集。在相衬显微镜(Nikon Eclipse Ti倒置显微镜)上集成SLIM模块(CellVista,Phi Optics,Inc.)采集荧光(ground truth)和SLIM(SLIM本质上是严格控制入射光和样本出射的散射光之间的相移)图像(见图2a)。以 π⁄2 的相移增量,记录与各个相移相关的四个强度帧,利用四个强度图像,将入射场和散射场的幅度从相位信息中解耦,并获得与样本相关的定量相位图(见图2b)。由于 SLIM 是共轴光路,相位测量在几分之一纳米路径长度内非常稳定。 相衬显微镜采取白光照明,SLIM 图像没有散斑,从而具有亚纳米空间光程灵敏度。 这些属性使 SLIM 非常 ...
)技术背景:相衬显微镜可以无需染色观察相位物体。大多数的活细胞是透明的(即相位物体),光的吸收和散射都很弱,由细胞厚度或折射率变化来改变入射光波的位相分布。而人眼只能感受光强的变化,不能辨别位相变化。 解决这一困难需要将位相变化转化为强度的变化。生物学家采用对透明细胞的染色技术达到这一目的。但是,染色会对细胞的健康、结构等带来一系列影响,使得我们不能在显微镜下如实的观察细胞的生命过程。Zernike发明的相衬显微镜通过改变直接透射光和相位物体微弱的散射光之间的位相关系,将空间的位相变化转换成人眼可观测的强度变化,使得透明相位物体无需染色即可清晰的观察其内部细节。然而,相衬显微镜只能定性观察,不 ...
。5.1a 相衬显微镜如果要成像的物体是透明的,且对入射波的相位产生轻微的改变(比如显微镜下对生物细胞成像),那么是有可能只通过光学处理来显现相位的。Zernike相衬显微镜就是基于这个原理制成。相衬显微镜假设被成像的物体o(x,y)是如果没有调制的偏置项相移π/2,即在图2的傅里叶平面上使用轴上相位滤波器,则检测到的图像的辐照度是图5是Zernike对比传统明场显微镜图像(a)和相衬显微镜图像(b)。这里需要重申一下,因为相衬显微镜是通过在光瞳平面放置相位板来直接显现相位,没有进一步的计算处理,因此,这只能算光学处理,而不是计算成像。5.1b 干涉度量和全息传统的测量光学相位的方法是将相位转 ...
)5.1a、相衬显微镜(Phase ContrastMicroscope)5.1b、干涉测量和全息(Inteferometryand Holography)5.1c、从强度复原相位(PhaseRetrieval from Magnitude)5.2、量子成像(QuantumImaging)5.3、体积成像(VolumetricImaging)5.3a、计算层析(ComputedTomography)5.3b、核磁共振成像(MagneticResonance Imaging)6、动机2:维度不匹配(Motivation 2: Dimensionality Mismatch)6.1、空间-光谱成像 ...
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