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已经跨越了以阿贝衍射极限为代表的一度难以逾越的分辨率障碍 ,开发多种成功的方法,如受激发射损耗(STED) 、单分子定位方法(PALM 和 STORM) ,结构照明显微术(SIM)和超分辨率光学波动成像(SOFI),这要归功于图像传感器技术的改进以及单分子光谱学的巨大进步。在这里,我们提出了一种新的显微技术,它利用 SPAD23阵列探测器的较高时间分辨率来测量荧光波动引起的相关性。在 ISM 架构中测量的这种相关性,然后被用作具有高达 4倍增强横向分辨率和增强轴向分辨率的超分辨率图像的对比度。仅用几毫秒的像素驻留时间就可以获得高信噪比的超分辨率图像。单光子探测器阵列SPAD23技术源于代尔夫特 ...
一种试图克服阿贝衍射极限的方法,通过使用纳米级纤维探针将光限制在一个小区域内,允许在亚波长尺度上进行地形和光学成像。由于这个原因,NSOM已被证明是一种有用的技术,不仅用于生物学目的,而且用于表征半导体等不同材料。在这种类型的显微镜中,光通过探针传递或收集,该探针可以具有悬臂结构或纤维探针的结构。此外,探头可以在光圈或无光圈模式下工作。在无孔径模式下,AFM(原子力显微镜)探针被涂上一层金属,以增强靠近其尖端的样品部分的电磁场,并与放置在远场的外部光源结合使用以进行照明(图1)。图1 :无光圈NSOM结构示意图。外部光源照亮靠近悬臂顶端的部分样品。散射回来的光被物镜收集起来。另一方面,在孔径模 ...
显微镜受到“阿贝衍射极限”的限制,在空间分辨率上存在天然瓶颈,导致很多领域的研究受到了阻碍。近年来,虽然有如STED、PALM、STORM等超分辨率显微技术不断成熟,但这些方法对设备配置和操作要求较高,实验复杂性大,价格昂贵,难以满足当今快速发展的科学研究。相比之下,一种被称为图像扫描显微技术(Image Scanning Microscopy, ISM)的方法正在受到关注。该方法仅需替换探测器并更改成像分析方案,便可实现分辨率与图像对比度的提升,具备较强的实用性。为进一步突破成像分辨率,同时保持系统的简洁性,研究人员将单光子雪崩二极管阵列(SPAD array)与ISM方法结合,提出了一种新 ...
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