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察效果。2.科勒照明(Kohler illumination)这是一种把光源像成在物镜入瞳面上的照明方法。它没有临界照明的那种缺点,整个系统如下图所示。图中的虚线是从光源到物镜孔阑的一对共轭关系,双点划线是从光源光阑J1到物面再到像面的另一对共轭关系,光源发出的光先经一个前置透镜L成像于聚光镜前的可变光阑J2上,聚光镜再将此光源像成在物镜的入瞳面上。在前置透镜后紧靠透镜处设置可变光阑,它被照明后具有均匀的亮度,并被聚光镜成像于物面上,使物面也得到均匀照明。调节光阑J2,可以使照明系统与不同数值孔径的物镜相匹配;调节光阑J1,可改变物面上的照明范围。对比前后两种照明方式,可以发现科勒照明可以是将 ...
D光源配置为科勒照明产生的均匀照明,辐照度范围为1-100mW/mm2。然而,单分子定位显微镜(SMLM)需要更高的辐照度,通过链接到显微镜临界落射照明器(critical epilluminator)的CELESTA光引擎(Lumencor, Inc., Beaverton OR),可以在样品表明提供10^4mW/mm2的辐照度(图6)。临界照明的使用是由科勒照明在光学上的低效率所决定的,因为科勒照明并没有覆盖整个光源表面或者发射光的全部角度分布。在临界照明中,光源被直接成像到样品平面上,这种方法更为高效,但对光源输出中的任何空间不均匀性也更为敏感。临界落射照明器的作用是均匀化任何空间上的不 ...
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