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光片荧光显微镜(LSFM)简介光片荧光显微镜技术已经彻底改变了生物显微镜技术,使生物样品的低光毒性长期3D成像成为可能。光片荧光显微镜(LSFM)是一种简单但功能强大的成像技术,可以对活体标本进行快速且无光毒性的3D检查。大多数LSFM实现依赖于荧光报告的样品标记来成像目标生物结构。这提供了荧光显微镜的特异性优势,使其在各种生物实验中取得成功。在LSFM中,通过样品的激光光片介导荧光激发。在其通过组织的传播过程中,部分激光向检测摄像机散射,这些光通常被特定的滤光片阻挡和丢弃。然而,这种散射光可以携带有关样品结构和组成的有价值的信息。当散射是非弹性的,例如拉曼散射时,得到的光谱可以提供三维的样品 ...
荧光显微镜(LSFM)是一种可以对活体标本进行快速且无光毒性3D观测的强大显微成像技术。LSFM技术将宽场成像的速度与适度的光学切片和低光漂白特点相结合,因此也被称为选择性平面照明显微镜(SPIM),或简称为“光片”。SPIM或LSFM共同的定义特征是从侧面对焦平面进行平面照明,在任何给定时间,仅对样品的一小部分进行照明,因此与宽场辐射荧光相比,可以最大限度地减少光损伤并提供改善信噪比的光学切片。此外由于图像是以宽场(2D平行)方式收集的,因此光片成像比一次仅检测一个像素的点扫描共聚焦显微镜快得多。由于三个关键特性,光片荧光显微镜正成为体积成像最流行的技术之一:1.激发点被限制在焦平面附近,光 ...
光显微镜 (LSFM) 或简称为“光片”,光片显微镜因其具有光损伤小、切片品质好、采集速率快的特点在体积成像中迅速普及。SPIM 的主要缺点是需要额外的光学器件来生成光片。常见的是,除检测物镜外,还需要一个与检测物镜正交放置的单独的照明物镜,其后连接生成光片的光学器件和激光源。本质上,显微镜需要围绕样品进行设计,添加额外的物镜和光路会给成像系统和样品安装带来空间限制。传统的共焦或落射荧光显微镜具有单一光路,可以容纳更广泛的样品。换句话说,SPIM 的优势是以任何单一工具的适用范围更窄为代价的,这导致了不同光片显微镜配置的激增。自 2010 年代初以来,应用科学仪器 (ASI) 一直采用模块化方 ...
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